L-3000四元低(dī)壓(yā)自(zì)動(dòng)進樣(yàng)高(gāo)效液相色譜用(yòng)於(yú)研究蛋(dàn)白(bái)質的結(jié)構(gòu)動力(lì)學和(hé)構(gòu)型變化(huà),可(kě)更好地確(què)定它(tā)們的高級結構。氘(dāo)是(shì)氫(qīng)的(dí)一(yī)種(zhǒng)重同(tóng)位(wèi)素,因此(cǐ)可以通(tōng)過質(zhì)譜(pǔ)對氘含量(liáng)進(jìn)行(háng)測量(liáng)或“稱重(zhòng)”。
科(kē)學家們(mén)使用HDX-MS研究獲得的(dí)信息(xī)對(duì)不同(tóng)“狀態(tài)”的蛋白質高級結構進行對比,如(rú)對比(bǐ)與(yǔ)候選(xuǎn)藥物(wù)結合(hé)前(qián)和(hé)與(yǔ)結合後的構(gòu)型變化(huà),定(dìng)位藥(yào)物結合部位和(hé)結(jié)合的(dí)強弱(ruò)。通(tōng)過(guò)計算(suàn)和比(bǐ)較氘(dāo)交換水平的差別(bié)來獲得蛋白(bái)質構型(xíng)變化的(dí)信息。HDX-MS能夠在溶液中(zhōng)監測蛋(dàn)白結合域(yù)相互作(zuò)用(yòng)情(qíng)況(kuàng),蛋(dàn)白(bái)質結合(hé)動(dòng)力學,配(pèi)體結(jié)合以及(jí)蛋(dàn)白(bái)質折疊(dié)等(děng)相關(guān)研(yán)究(jiū)。
HDX-MS研究需(xū)要對(duì)蛋(dàn)白質構型的(dí)微小變化(huà)進行檢(jiǎn)測,高(gāo)效率的色(sè)譜(pǔ)分離對達(dá)到高(gāo)品(pǐn)質的(dí)數據(jù)結(jié)果(guǒ)至關(guān)重要(yào)。ACQUITY UPLC M-Class係統更高的耐壓(yā)確(què)保了能(néng)夠在(zài)0℃對(duì)酶(méi)切(qiē)肽段(duàn)快速進行LC分離和(hé)質譜檢測(cè)。全(quán)自(zì)動HDX-MS係統整合(hé)了(liǎo)HDX-MS的(dí)所有(yǒu)步驟(zhòu),包(bāo)括全(quán)自(zì)動的氫(qīng)氘交(jiāo)換(huàn)樣(yàng)品(pǐn)製(zhì)備過程,蛋(dàn)白質序列(liè)確定,氘(dāo)交換曲綫(xiàn)以(yǐ)及沃特世*的DyanmX HDX數(shù)據分(fēn)析軟件。
同(tóng)時發(fā)布的(dí)還有沃特世(shì)專門(mén)開發的(dí)用(yòng)於(yú)用於(yú)蛋(dàn)白(bái)質“在(zài)綫(xiàn)酶切”的(dí)UPLC色譜(pǔ)柱(zhù),即Waters Enzymate BEH在(zài)綫Pepsin酶切柱,將HDX-MS效果提升(shēng)到(dào)一(yī)個新(xīn)高(gāo)度。ACQUITY UPLC M-Class係(xì)統與Waters SYNAPT G2-Si或(huò)Xevo G2-S QTof質(zhì)譜儀(yí)聯用,提(tí)供高質量(liáng)的(dí)圖譜(pǔ)和數(shù)據(jù),得(dé)到(dào)HDX-MS分(fēn)析所(suǒ)需要的(dí)微小質(zhì)量變(biàn)化(huà)。將所(suǒ)有(yǒu)這些(xiē)創(chuàng)新(xīn)技術組合(hé)在一起,沃(wò)特世(shì)提(tí)供(gōng)了完整(zhěng)的(dí)且(qiě)*的HDX-MS分(fēn)析平(píng)台(tái)。
L-3000四(sì)元(yuán)低(dī)壓自動(dòng)進樣(yàng)高(gāo)效液相色譜(pǔ)
對於復(fù)雜樣品,特別是當樣品(pǐn)中(zhōng)的(dí)目標組分如蛋白(bái)質,肽或(huò)小分子(zǐ)的動態(tài)範圍(wéi)很(hěn)寬時,二維LC是非常有用(yòng)的策略(lüè)。利用此技(jì)術能(néng)夠增(zēng)加色譜峰容(róng)量(liáng),具(jù)體的操(cāo)作是先(xiān)通過(guò)*維(wéi)分離對(duì)蛋(dàn)白或肽進行(háng)分組(zǔ),所得(dé)到的(dí)每一個餾分(fēn)經(jīng)過富(fù)集,再(zài)通過具有不同(tóng)選(xuǎn)擇性(xìng)的(dí)第二(èr)維色(sè)譜柱進行(háng)分離。
ACQUITY UPLC M-Class係統(tǒng)采用直(zhí)觀易用(yòng)的向導(dǎo)菜單進(jìn)行方法設置(zhì),標(biāo)準化的色(sè)譜柱(zhù)以及具(jù)有高重現(xiàn)性(xìng)的色譜儀(yí)器(qì)有效(xiào)簡化(huà)了2D-LC分(fēn)離。智(zhì)能(néng)化閥操作增(zēng)加(jiā)了(liǎo)樣品(pǐn)通量,同時(shí)zui大程度(dù)地(dì)提高(gāo)數據質(zhì)量。
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